服务热线:0510-83786900
当前位置:新闻动态

高效液相色谱仪按其分离机理-可分为四种类型

* 来源: 无锡赛那尔 * 作者: sainaer * 发表时间: 2021-09-06 8:52:10
      高效液相色谱仪(HPLC)是应用高效液相色谱原理,主要用于分析高沸点不易挥发的、受热不稳定的和分子量大的有机化合物的仪器设备。它由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。HPLC广泛应用于生命科学、食品科学、药物研究以及环境研究中。储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式输出检测结果。
  液相色谱仪按其分离机理,可分为四种类型。
  吸附色谱法的固定相为吸附剂,色谱的分离过程是在吸附剂表面进行的,不进入固定相的内部。与气相色谱不同,流动相(即溶剂)分子也与吸附剂表面发生吸附作用。在吸附剂表面,样品分子与流动相分子进行吸附竞争,因此流动相的选择对分离效果有很大的影响,进口液相色谱仪一般可采用梯度淋洗法来提高色谱分离效率。
  在聚合物的分析中,吸附色谱一般用来分离添加剂,如偶氮染料、抗氧化剂、表面活性剂等,也可用于石油烃类的组成分析。
  分配色谱法
  这种色谱的流动相和固定相都是液体,样品分子在两个液相之间很快达到平衡分配,利用各组分在两相中分配系数的差异进行分离,类似于萃取过程。
  一般常用的固定液有β(ODPN)、聚乙二醇(PEG400~4000)、*撑乙二醇(TMG)和角鲨烷(SQ)。采用与气相色谱(GC)同样的方法,将固定液涂渍在多孔的载体表面,但在使用中固定液易流失。目前,应用较多的是键合固定相。在这种固体相中,固定液不是涂在载体表面,而是通过化学反应在纯硅胶颗粒表面键合上某种有机基团。
  例如,利用氯代十八烷基硅烷与硅胶表面的羟基(-OH)之间的反应就可以形成一烷基化表面。这种固定液的优点是不易被流动相剥蚀。在分配色谱法中,流动相可为纯溶剂,也可以采用混合溶剂进行梯度淋洗,其极性应与固定液差别大一些,以避免两者之间相溶。
  在我们做实验的时候用液相色谱仪分析过程的时候影响溶液迁移的因素比较多。同一样的组分在不同的色谱调件下保留的值也会不同,即使是在一样的测定条件下。同一组分在不同的色谱柱上面保留的数值差别也会不同。所以,液相色谱和气象色谱相对比,定性的难度大很多,液相色谱仪分析经常使用的定性方法有很多。比如,利用已知标准样品定性,利用检测器的选择性定性或者利用紫外检测器全波长扫描功能等来定性。